La ocupación del maestrazgo de Santiago, vacante por la muerte de Pacheco, dividió una vez más a los nobles que aspiraban al control de la orden: el duque de Alburquerque, Beltrán de la Cueva; el conde de Benavente; el marqués de Santillana; el hijo de Juan Pacheco y marqués de Villena, Diego Téllez, a los que se unieron, Rodrigo Manrique, conde de Paredes, Gabriel Manrique, conde de Osorno y comendador mayor de Castilla, y Alonso de Cárdenas, comendador mayor de León, todos los cuales buscaron el apoyo del rey o del arzobispo de Toledo, Alonso Carrillo. Esta vez Carrillo estaba al lado de Enrique IV y era partidario de dar el maestrazgo al marqués de Villena, contra la opinión de los demás aspirantes y de Isabel, que confiaba en que Roma nombrara maestre o administrador de la Orden de su marido, Fernando.
A todo puso fin la muerte de Enrique IV el 12 de septiembre de 1474, dos meses y ocho días después de la muerte del marqués de Villena y maestre de Santiago. Tuvo un reinado de 20 años y 5 meses y sus restos fueron depositados en el monasterio de San Jerónimo del Paso. Tras su muerte, se inició una Guerra de Sucesión, que se prolongó hasta 1479 , entre los partidarios de Isabel y los partidarios de Juana, de la que salió victoriosa Isabel, que pasó a ser reina de Castilla, mientras que Juana se retiró al monasterio de Santa Clara de Coimbra.
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