María I de Escocia, llamada María Estuardo nació el 8 de diciembre de 1542 en el Palacio de Linlithgow, Escocia. María fue la menor de tres hijos, aunque la única superviviente del matrimonio forjado por el rey Jacobo V de Escocia y de María de Guisa.
María es conocida en la historia por la gran tensión que mantuvo con su prima segunda Isabel I de Inglaterra, a causa del control de sus respectivos reinos. Aunque finalmente ella terminó siendo ejecutada el 8 de febrero de 1587.
El único interés que don Juan de Austria encontró por María Estuardo fue su corona, ya que la gran ambición de don Juan fue obtener el título de Alteza, que su padre le había negado al reconocerlo como hijo. Para conseguir dicho título don Juan pretendía la invasión católica de Inglaterra, el matrimonio con María I Estuardo y conseguir de esa manera no solo el título que tanto ansiaba sino, además, un reino propio.
Su plan parecía contar con el apoyo del papa y los católicos ingleses, incluso, en un momento dado, fue sondeado por un enviado de la Reina sobre la posibilidad de un matrimonio con la propia Isabel de Inglaterra, de lo cual informó puntualmente al rey Felipe, que manifestó su desaprobación.